Cikatriĝo en RDEB (2023)

Nirogacestat, drogo ĵus aprobita en Usono por trakti specon de benigna kresko (desmoidaj tumoroj) nerilata al EB, estis testita. Ĝi igis haŭtajn ĉelojn kreskitajn en la laboratorio de homoj kun RDEB pli sanaj kaj povus esti reuzitaj por redukti simptomojn por homoj vivantaj kun EB.

Esploristoj publikigis siajn rezultojn en la Journal of Investigative Dermatology en 2024 kaj prezentis patentan peton titolitan "Gamma-secretase-inhibidores por uzo en la traktado de epidermolysis bullosa".

Haŭtaj ĉeloj (fibroblastoj) de homoj kun RDEB estas kultivitaj en la laboratorio kaj la niveloj kaj specoj de molekuloj nomitaj mikroRNA-oj kiujn ili produktas estas esploritaj. La rolo de ĉi tiuj molekuloj en kontrolado de cikatriĝo (fibrozo) povas igi ilin celoj por EB-terapioj. Kvar mikroRNA-molekuloj estis elektitaj por plia studo ĉar ili ĉeestas ĉe multe pli altaj (tri el la kvar) aŭ pli malaltaj niveloj en ĉeloj de homoj kun RDEB. Oni pruvis, ke ili influas fibrozajn kaj inflamajn procezojn.

Aparte, drogo estanta evoluigita por trakti kancerojn pruviĝis esti ebla terapio por reduktado de cikatriĝo en RDEB.

Ĉi tiu infografio, disponigita de la esploristo en 2022, ilustras la laboron en progreso:

Prof Giovanna Zambruno (dekstre) kun D-ro Angelo Giuseppe Condorelli en la ĉelkulturĉambro ĉe Infanhospitalo Bambino Gesù. D-ro Condorelli estas la postdoktoriĝa esploristo respondeca pri la projekto ĉiutage en la laboratorio.

Esplorgvidanto:

D-ro Giovanna Zambruno, Konsultistino, Infanhospitalo Bambino Gesù, IRCCS, Romo, Italio

D-ro Zambruno diplomiĝis pri Medicino ĉe la Universitato de Pavio, Italio (1982) kaj finis sian loĝejan trejnadon pri Dermatologio kaj Venereologio en 1985 en la sama Universitato. Sekvante esplorkunecon ĉe la INSERM Laboratorio de Dermatologia kaj Imunologia Esplorado kaj ĉe la Sekcio de Dermatologio de Claude Bernard University, Lyon, Francio (1985-1986), ŝi iĝis laborantarano ĉe la Sekcio de Dermatologio, Universitato de Modeno, kie ŝi establis ŝia unua esplorgrupo. En 1995, ŝi moviĝis al la Istituto Dermopatico dell'Immacolata (IDI), kie ŝi estis Direktoro de la Laboratorio de Molekula kaj Ĉela Biologio (1995-2015) kaj tiam Scienca Direktoro (2017-2018). Ŝi estas nuntempe konsultisto ĉe Infanhospitalo Bambino Gesù, Romo, kie ŝi kunlaboras kun la Patologio kaj Dermatologio-Unuoj kaj la Genetiko kaj Maloftaj Malsanoj Esplordivido. Dum la pasintaj 25 jaroj ŝia klinika kaj esplora agado estis koncentrita al maloftaj haŭtaj malsanoj, precipe heredita epidermoliza buloza. Ŝi verkis pli ol 270 publikaĵojn en kolegaro-reviziitaj ĵurnaloj, 80 el kiuj pri epidermolysis bullosa.

Kunenketistoj:

Dr Teresa Odorisio, Laboratorio de Molekula kaj Ĉela Biologio, IDI-IRCCS, Romo, Italio
Kunlaboranto: Profesoro Leena Bruckner-Tuderman, Universitätsklinikum Freiburg – Hautklinik, Germanio

"Vundo- kaj inflamo-movita fibrozo estas konstanta kaj progresema trajto en RDEB. Ĝi respondecas pri formado de mitaŭloj, membrokuntiriĝoj kaj mukozaj striktoj, kaj estas implikita en la evoluo de frua kaj agresema haŭta skvamĉela karcinomo. Kontraŭbatali fibrozon reprezentas strategion por plibonigi la kurson de la malsano kaj la vivokvaliton de pacientoj. Por la unua fojo, niaj analizoj esploros la esprimnivelojn de granda nombro da miRNA-oj kaj ilian funkcian rolon en RDEB-fibrozo. miRNA-analizo estos la deirpunkto por identigi kaj malimpliki novajn drogeblajn celojn/padon por estontaj, novigaj kontraŭfibrotaj terapiaj strategioj.

– D-ino Giovanna Zambruno

Subvencio: MikroRNAoj en distrofa epidermoliza buloza fibrozo: esprimprofilado, agado kaj terapiaj perspektivoj

Nia DNA konsistas el genoj, kiuj konservas la informojn por konstrui proteinojn, kiuj formas nian korpon. La DNA-instrukcioj estas transskribitaj en RNA-molekulojn nomitajn mesaĝaj RNA-oj (mRNA-oj), kiuj servas por produkti ĉi tiujn proteinojn (traduko). Tamen, kelkaj RNA-oj, nomitaj ne-kodaj RNA-oj, ne estas tradukitaj en proteinojn sed reguligas la kvanton de proteinoj produktitaj. MikroRNAoj (miRNAoj) estas ne-kodaj RNAoj kiuj blokas proteinproduktadon per interagado kun specifaj mRNAoj. MiRNAoj estas ŝlosilaj reguligistoj de ĉiuj biologiaj procezoj kaj ilia nenormala funkcio kontribuas al multaj malsanoj, inkluzive de fibrotaj (cikatraj) haŭtaj malordoj.

En recesiva distrofa epidermolizo bullosa (RDEB) senĉesa veziketo kondukas al severa fibrozo kiu ludas gravan rolon en la disvolviĝo de la plej severaj malsankomplikaĵoj. Nia grupo observis, ke iuj miRNA-oj estas pli abundaj en fibroblastoj de RDEB-pacientoj (RDEBF-oj) kaj praktikas por-fibrotan agadon en vitro. Surbaze de tiuj antaŭstudoj, la nuna projekto celas identigi pliajn miRNA-ojn malreguligitajn en RDEBF-oj kaj karakterizi ilian rolon en ŝlosilaj fibrotaj procezoj kiel ekzemple la produktado kaj liberigo de gravaj por-fibrotaj molekuloj (ekz. la transforma kreskfaktoro-b1) kaj la dermal. (haŭto) rigidiĝo. Ĉi tiu studo kontribuos vastigi scion pri malsanpathomekanismoj kaj identigi novajn miRNA-ojn kaj miRNA-celojn kiel eblajn celojn por novigaj terapioj por limigi fibrozon.

Nia DNA konsistas el genoj, kiuj stokas la informojn por konstrui proteinojn formantajn nian korpon. La DNA-instrukcioj estas transskribitaj en RNA-molekulojn nomitajn mesaĝaj RNAoj (mRNAs), kiuj servas por produkti proteinojn. Tamen, familio de malgrandaj RNA, nomitaj mikroRNA, ne iĝas proteinoj sed reguligas la kvanton de proteinoj produktitaj. MicroRNAs blokas proteinproduktadon per interagado kun specifaj mRNAoj, difinitaj kiel mikroRNA-celoj. MicroRNAs estas esencaj reguligistoj de ĉiuj biologiaj procezoj kaj ilia misfunkciado kontribuas al multaj malsanoj, inkluzive de la recesiva distrofa epidermolizo bullosa (RDEB) kaj ĝiaj severaj klinikaj komplikaĵoj, kiel ekzemple haŭtinflamo, fibrozo kaj kancero-evoluo.

En fibrotaj histoj, fibroblastoj produktas troajn kvantojn de "fibrotaj" proteinoj, plejparte kolagenoj, kiuj estas deponitaj ekster la ĉeloj, kaj montras pliigitan kapablon kuntiri la histon ĉirkaŭ ili, kondukante al historigideco kaj misfunkcio. Nia antaŭa studo montris, ke mikroRNA nomita miR-145-5p, estas pli abunda en fibroblastoj de RDEB-pacientoj kaj pruvis sian rolon en fibrotaj procezoj. En ĉi tiu projekto ni taksis la abundon de centoj da mikroRNAs samtempe kaj komencis esplori iliajn funkciojn. Ni identigis grupon de 36 mikroRNA dereguligitaj en fibroblastoj de RDEB (tio estas molekuloj almenaŭ duoble pli malpli abundaj rilate ĉelojn de sanaj donacantoj). Poste, ni elektis por pliaj esploroj kvar mikroRNA-ojn, ĉeestantajn en pliigita aŭ reduktita kvanto en RDEB-ĉeloj kompare kun kontroloj. Ni observis, ke la farmakologia modulado de ĉi tiuj mikroRNAs kapablas kontraŭstari la produktadon de tipaj fibrotaj proteinoj per RDEB-fibroblastoj.

Paralele, ni profundigis niajn studojn pri lastatempe identigita molekula mekanismo implikita en RDEB-fibrozo, nomita Notch-vojo. Ĉela vojo konsistas el bone organizita serio de agoj movitaj de specifaj molekuloj (nomitaj padmembroj), kaŭzante malsamajn biologiajn okazaĵojn, kiel ekzemple ĉeldividiĝo, movado aŭ fibrozo. Niaj studoj rivelis ke la inhibicio de Notch-pado per malsamaj aliroj, inkluzive de drogoj komerce haveblaj sed ĝis nun uzataj por trakti malsanojn malsamajn de RDEB, rimarkeble mildigas plurajn pro-fibrotajn trajtojn en RDEB-ĉeloj. Detale, RDEB-fibroblastoj traktitaj kun specifaj molekuloj kiuj reduktas la agadon de Notch elmontras reduktitan kapablon i) kontrakti kolagenĝelojn (kiuj reprezentas modelon de la kapablo de fibroblastoj ŝrumpi la ĉirkaŭan histon), ii) deponi "fibrozajn" proteinojn. (kolagenoj) ekster la ĉelo, iii) por sekrecii la plej gravan fibrotikan molekulon, t.e. la transformiĝantan kreskfaktoronbeta1, iv) por moviĝi kaj multiĝi, kaj (v) por produkti larĝan gamon de molekuloj kiuj estas tipe abundaj en fibrotaj histoj. Kunigitaj, niaj datumoj subtenas la biologian gravecon de Notch-pado en RDEB-rilataj malsanprocezoj, kaj ĝian inhibicion kiel noviga terapia celo por kontraŭstari haŭtan fibrozon. (El 2022 progresraporto).

Nia genetika materialo (DNA kaj RNA-sekvencoj) stokas kaj transdonas la informojn por formi ĉiujn korpokomponentojn, inkluzive de proteinoj kaj enzimoj, kaj por efektivigi ajnan esencan procezon. La taŭga kvanto kaj agado de ĉiu biologia molekulo estas decidaj por certigi histon kaj organfunkciecon kaj, tiel, konservi sanaj. Specife, proteinabundo estas kontrolita per malsamaj genetikaj mekanismoj, inkluzive de la ago de mikroRNAs - larĝa familio (>2500 membroj) de mallongaj RNA-molekuloj kun reguligaj roloj.

MikroRNAs haltas proteinproduktadon malhelpante la "transiron" de la proteinŝablonoj, nomitaj mesaĝistoj RNA (mRNAoj), en proteinojn. Ĉiu mikroRNA modulas specifan aron de mRNA/proteinoj, difinitaj kiel mikroRNA-celoj en ĉel- kaj kuntekst-dependa maniero. MikroRNA-misfunkciado kontribuas al gamo da malsanoj, inkluzive de la recesiva distrofa formo de epidermolysis bullosa (RDEB) kaj ĝiaj severaj klinikaj komplikaĵoj, kiel ekzemple inflamo, fibrozo kaj kancerevoluo.

En fibrotaj histoj, la ĉefaj dermal-loĝantaj ĉeloj, nomitaj fibroblastoj, produktas troajn kvantojn de malutilaj "fibrozaj" proteinoj kaj "por-fibrotaj" molekuloj, kiuj kontribuas al haŭta rigideco kaj fibroblasta misfunkcio.

En ĉi tiu studo, ni identigis kaj esploris la biologian funkcion de du mikroRNAs, miR-129-1-3p kaj miR-210-3p, trovitaj esti malreguligitaj en fibroblastoj akiritaj de pacientoj kun RDEB (RDEB-FBs). Specife, la kvanto de miR-210-3p estis pliigita en RDEB-FBs dum miR-129-1-3p estis reduktita kompare kun ĉeloj de sanaj organdonacantoj. En RDEB-FBs, la farmakologia inhibicio de miR-210-3p de molekulo difinita "kontraŭ-miR" reduktis la kapablon de la RDEB-FB por moviĝi, la tielnomita "migradrapideco", kaj por sintezi por-fibrotajn proteinojn. , inkluzive de grupo de molekuloj implikitaj en ĉela respondo al oksidativa stres-induktita difekto. En malsama aro de eksperimentoj, la pliiĝo de miR-129-1-3p-niveloj de molekulo difinita "imita" (miR-129-1-3p-imita) malpliigis ĉelan kuntiriĝecon - markostampo de por-fibrotaj fibroblastoj - kaj reduktis. la esprimo de elekto de pro-fibrotaj proteinoj. Ĉi tiuj trovoj indikas la kontraŭfibrotan rolon de miR-129-1-3p kaj, siavice, la malutilan efikon de ĝia subreguligo en fibroblastoj de pacientoj.

Poste, ni identigis kaj validigis novan pro-fibrotan proteinon reguligita de miR-129-1-3p, kio signifas, ke malaltaj niveloj de miR-129-1-3p (kiel ni observis en RDEB-fibroblastoj) respondas al pli altaj niveloj de ĉi tiu nova miR. -129-1-3p molekula celo.

Paralele, ni finis studon priskribanta la pro-fibrotan rolon de NOTCH-vojmembroj en RDEB-fibrozo. Detale, niaj trovoj akiritaj en fibroblastoj de pacientoj kun RDEB malkaŝis, ke la inhibicio de NOTCH signala kaskado de PF-03084014 (nirogacestat), molekulo de la familio de gama-sekretazaj inhibidores, rimarkeble mildigas malsamajn fibrotajn trajtojn, kiuj iras de kolagendeponado ĝis la sekrecio de la fibroz-induktanta faktoro TGF-ß1 kaj produktado de por-fibrotaj proteinoj. Notinde, PF-03084014 estis lastatempe aprobita de FDA por la traktado de desmoidaj tumoroj kaj komercigita kiel OgsiveoTM fare de SpringWorks Therapeutics Inc. En la estonteco, ĉi tiu drogo povus esti efike ekspluatata por ĝia repurposing por la uzo kiel kontraŭfibrota agento en RDEB. Konklude, niaj datumoj forte subtenas la biologian gravecon de NOTCH-vojo en RDEB-rilataj malsanprocezoj, kaj ĝian inhibicion de specifaj molekuloj kiel noviga terapia strategio por kontraŭstari haŭtan fibrozon en RDEB. (De 2024 fina raporto).