Rekte al enhavo

Ŝprucaĵo sur RDEB-genterapio (2022)

Paciencaj efikaj terapioj por RDEB estas ege bezonataj. Ĉi tiu grupo proponas trakti ĉi tiun defion disvolvante ŝprucigan genterapion por RDEB dizajnita por pli daŭra terapia utilo inkluzive de preventado de cikatriĝo..

Projekta resumo

D-ro Su Lwin en laboratoriomantelo en la laboratorio ridetante al la fotilo

Dr Su Lwin laboras en Londono, UK, pri genterapio por RDEB kun Profesoro John McGrath kaj Dr Michael Antoniou. Homoj kun RDEB havas ŝanĝojn en la COL7A1-genoj, kiujn ili heredis de ambaŭ gepatroj, do ne povas fari specon de kolageno necesa por sana haŭto. La celo de ĉi tiu laboro estas evoluigi manieron aldoni laborantajn COL7A1-genojn al haŭtaj ĉeloj prenitaj de ĉiu RDEB-paciento, kreskigante tiujn ĉelojn en la laboratorio kaj poste ŝprucante ilin sur areoj trafitaj de RDEB-simptomoj. Ĉi tiuj ĉeloj devas esti montritaj por pluvivi, fari funkciantan kolagenon kaj kreski en laboran haŭton.

Pri nia financado

Esplorgvidanto Doktoro Su Lwin
institucio John's Institute of Dermatology, KCL, UK
Specoj de EB  RDEB
Partopreno de paciento Neniu.
Sumo de financado £174, 023
Longo de la projekto 2 jaroj (plilongigita pro Covid)
Komenca dato Junio ​​2019
Debra interna ID Lwin1

Projektaj detaloj

Kvin novaj genterapiaj virusoj estis kreitaj kaj nuntempe estas studataj por vidi kiom bone ili restarigas la mankantan kolagenproteinon en ĉeloj de RDEB-pacientoj.

Haŭtaj ĉeloj, nomitaj keratinocitoj kaj fibroblastoj, estis kultivitaj en la laboratorio kaj montritaj por la unua fojo kunveni sin en tavolojn kiel vidite en haŭto post ŝprucado.

Specifa speco de fibroblasto helpas resaniĝi sen cikatriĝo kaj tiuj estis sukcese kolektitaj kaj kreskigitaj en la laboratorio de RDEB-paciencaj ĉeloj kaj frostigitaj por estonta uzo.

La ŝpruciga genterapia procezo estis provita tiel ke klinika provo povos daŭrigi se iu el la kvin novaj genterapiaj opcioj funkcias bone en ĉeloj.

Esploristoj publikigis recenzon de la potencialo de ilia laboro fine de 2021 kaj registris sisteman revizion en 2022. En majo 2022 Dr Lwin kaj Profesoro McGrath agnoskis financadon de DEBRA UK en artikolo titolita Restarigo de kolageno de tipo VII en haŭto.

Lead-esploristo: Doktoro Su Lwin estas Dermatologio-Registristo kaj Honorary Clinical Research Fellow ĉe la Instituto de Dermatologio de St John, NHS Foundation Trust de Guy kaj St Thomas, kaj King's College London. Ŝi laboris pri EB-esplorado kiel la Ĉefa Klinika Esploristo pri pluraj pioniraj klinikaj provoj pri geno kaj ĉelterapio ekde 2014 kiam ŝi aliĝis al la Laboratorio de Prof John McGrath, inkluzive de la provoj EBSTEM, GENEGRAFT kaj LENTICOL-F. Ŝi daŭre kunlaboras kun naciaj kaj internaciaj kolegoj por dediĉi sian esploradon en evoluigado de efikaj kaj klinike realigeblaj terapioj por individuoj kun EB.

Kunesploristoj:
Profesoro John McGrath MD FRCP FMedSci tenas la Mary Dunhill Chair en Haŭta Medicino en King's College London kaj estas Kapo de la Genetika Haŭta Malsano-Unuo, same kiel Honorary Consultant Dermatologist ĉe St John's Institute of Dermatology, la NHS Foundation Trust de la Ulo kaj St Thomas en Londono. Liaj ĉefaj interesoj estas en genetiko kaj regenera medicino kaj kiel tiuj influas dermatologion kaj haŭtajn malsanojn. Li estas engaĝita en pluraj venontgeneraciaj sekvencaj iniciatoj plibonigi diagnozon por genodermatozoj kaj ankaŭ estas ĉefenketisto por kelkaj fruaj fazaj klinikaj provoj de ĉelaj kaj genterapioj por pacientoj kun hereditaj haŭtaj malsanoj.

D-ro Michael Antoniou estas kapo de la Gena Esprimo kaj Terapio-Grupo ene de la Sekcio de Medicina kaj Molekula Genetiko de King's College London, kie li estas bazita ekde 1994. Liaj esplorinteresoj inkludas esplori bazajn mekanismojn de genreguligo kaj uzi tiujn eltrovaĵojn por evoluigi gen-bazitan terapian. produktoj. Kun partneroj en industrio, D-ro Antoniou evoluigis tre efikan genesprimplatformon (UCOE®-teknologio) por la fabrikado de terapiaj proteinoj kiel ekzemple antikorpoj same kiel uzo en genterapiaj medikamentoj. Li ankaŭ evoluigis genterapian medicinon kiu estas nuntempe en klinikaj provoj en Italio por la sangomalsano b-talasemio. Ĝenerale la grupo de D-ro Antoniou estas gvidanto en evoluigado de genterapiaj medikamentoj kiuj povas funkcii en tre reproduktebla kaj stabila maniero kaj tiel disponigi longperspektivan terapian efikecon. Ĉi-rilate, la kontribuo de D-ro Antoniou al ĉi tiu projekto estos decida por atingi daŭran terapian rezulton post genterapio de pacientoj RDEB.

Kunlaborantoj:
Prof Alain Hovnanian kaj Dr Matthias Titeux, INSERM UMR 1163, Imagu Instituto, Parizo, Francio.

"Pacientamikaj efikaj terapioj por RDEB estas senespere necesaj. Ĉi tiu grupo proponas trakti ĉi tiun defion disvolvante ŝprucigitan genterapion por RDEB desegnita por pli daŭra terapia utilo inkluzive de preventado de cikatriĝo "

Doktoro Su Lwin

Grant Titolo: Antaŭklinika studo de ŝprucigita genterapio por recesiva distrofa epidermolizo buloza.

Recesiva distrofa epidermoliza buloza (RDEB) estas unu el la plej severaj formoj de EB kun signifa malsanŝarĝo kaj alta morteco pro haŭta skvamoza karcinomo (cSCC). Rezultante de mutacioj en la COL7A1-geno kiu produktas tipon VII-kolageno, ĝi kondukas al veziketoj kaj histomalfortikeco. Nur paliativa prizorgo estas nuntempe havebla; tial, paciencaj efikaj terapioj estas neplenumebla bezono. Ĉi tiu grupo proponas trakti ĉi tiun defion disvolvante ŝprucigan genterapion por RDEB dizajnita por pli daŭra terapia utilo, inkluzive de la preventado de cikatriĝo.

Konstruante sur la lastatempa genterapia klinika testo, Lenticol-F, la plano estas kompletigi la proprajn haŭtĉelojn de RDEB-paciento kun funkciaj kopioj de la COL7A1-geno. Por atingi tion, ili antaŭvidas uzi formon de handikapita viruso nomata lentiviruso por liveri la genon en keratinocitojn kaj fibroblastojn kaj poste ŝprucigi ilin sur la tuŝitan haŭton kun la helpo de la SkinGun™ desegnita de la bioteknologia kompanio. RenovaCare.

Komence, la projekto serĉos generi pruvon de koncepto kaj taksi ĉu la ŝprucitaj ĉeloj formas funkcian haŭton uzante bestajn modelojn. Ilia celo estas taksi la efikecon kun kiu tiuj virusvektoroj liveras la funkcian genon al la propraj ĉeloj de pacientoj kaj kontroli ĉu la terapia utilo estas longdaŭra.

La dependeco de ĉela ŝprucaĵapliko por liveri la genan kodigon por tipo VII-kolageno eliminus la bezonon de enpenetraj proceduroj kaj disponigus paciencan traktadon. Plie, gene kompletigitaj ĉeloj povus esti pli rapide kreskigitaj kaj stokitaj ĉe malaltaj temperaturoj ĝis la paciento estas preta ricevi ilin, kio signife plibonigus la klinikan fareblecon de genterapio.

Ĉi tiu bildo ilustras la proponitan ŝprucigan genon/ĉelterapian aliron por RDEB.

Ĉi tiu financado permesos al la esploristoj akiri la esencajn datumojn de ŝpruciga genterapio necesaj por homaj aplikoj kiuj povas esti pli facile haveblaj por klinika uzo, tiel profitigante pli larĝan populacion de individuoj kun RDEB.

Ŝpruciga genterapio por recesiva distrofa epidermolizo buloza: Antaŭklinikaj studoj de lentiviral-mediaciita COL7A1-kompletigita epiderma stamĉelo kaj CD39 + CD26- fibroblasta ŝpructerapio.

Ĉi tiu esplorprojekto temigas recesiva distrofa epidermolizo buloza (RDEB), la plej severa formo de EB. RDEB estas kaŭzita de misa COL7A1 geno kiu siavice rezultigas foreston aŭ malfunkcian tipon VII-kolagenan proteinon (C7). C7 formas la hok-similajn strukturojn nomitajn ankraj fibriloj (AF) kiuj tenas la supran epidermon kaj la pli malaltajn dermtavolojn de la haŭto. En RDEB, mankhavaj aŭ malfunkciaj C7 kaj AFs tenantaj la dermon kaj epidermon rezultigas veziketojn kaj eroziojn kaj kronikajn vundojn. Serĉante efikan traktadon por RDEB, ni proponis fari serion da laboratorio-bazitaj eksperimentoj en la laboratorioj ĉe King's College London kaj ĉe INSERM en Parizo, kunlabore kun nia industria partnero RenovaCare Inc. por trakti la nekontestetajn bezonojn de RDEB-terapio. per evoluigado de ŝprucigita genterapio por individuoj kun RDEB, nome la Spraycol-projekto.

En resumo, estas tri unikaj novigoj al ĉi tiu projekto: pli efika kaj pli daŭra teknologio de genterapio, pacienca, ne-invasiva ŝpruciga livera aparato uzanta SkinGun™ de la bioteknologia firmao RenovaCare Inc., kaj pli rapida klinika-traduka aliro.

Malgraŭ la senprecedencaj defioj de prokrastoj de projekto, vojaĝlimigoj kaj fermo de landlimoj pro la tutmonda pandemio, kaj la morto de membro de nia industria kunlaboranto, la sekva progreso estis farita:

  1. Ni sukcese konstruis kaj sintezis kvin novajn pintnivelajn genterapiajn konstrukciojn uzante handikapitan formon de viruso, desegnita por plibonigita efikeco en liverado de la COL7A1-geno al RDEB-paciencaj ĉeloj. Tiuj nuntempe estas validigitaj por sia efikeco kaj efikeco de restarigo de la mankanta proteino C7 en paciencaj ĉeloj.
  2. Esenca parto de ĉi tiu projekto estas pruvi, ke la ĉeloj de la supraj kaj malsupraj tavoloj de la haŭto - keratinocitoj kaj fibroblastoj, post kiam ŝprucitaj, kapablas kunveni en simila modo al tiu de la homa haŭto. Por fari tion, ni devis produkti keratinocitojn kaj fibroblastojn etikeditajn per du malsamaj koloroj - ruĝa kaj verda, por ke ni povu bildigi ilin kaj observi ilian konduton sub la mikroskopo. Ĉi tiuj etikeditaj ĉeloj, kune kun ne-etikeditaj ĉeloj estis produktitaj kaj estis sukcese ŝprucitaj por vidi ĉu duoble-tavola haŭtostrukturo estas formita post ŝprucado. De ĉi tiuj eksperimentoj, ni montris fruan indicon pri vundkuracado per la ŝprucitaj sur homaj haŭtaj ĉeloj same kiel gen-redaktitaj RDEB-paciencaj ĉeloj.
  3. Ni ankaŭ montris, ke subpopulacio de RDEB-fibroblastaj ĉeloj, kiu estas esenca por redukti cikatrojn kiam vundresaniĝo okazas, estis sukcese izolita de paciencaj ĉeloj kaj aspektas sana. Ni ankaŭ montris, ke la izoleca metodo uzata por riĉigi ĉi tiun subpopulacion ne malhelpas ĉelojn kreski, kio ebligas al ni kreskigi pli da ĉeloj kaj frostigi ilin por estonta uzo. Tiu subpopulacio de fibroblastoj estas de speciala intereso ĉar ili havas unikajn trajtojn en vundkuracado sen kaŭzado de cikatriĝo.

Per ĉi tiu projekto, ni ekspluatis unikajn ŝancojn kiuj ebligos pli rapidan vojon al klinika tradukado de ŝpruciga genterapio per kunlaborado kun niaj longperspektivaj internaciaj partneroj de INSERM, Parizo kaj CIEMAT, Madrido per testado de ilia jam orfa medikamento nomita genterapio. konstrukcioj.

Multaj valoraj lecionoj estis lernitaj per ĉi tiu studo.

Unue, ni eksciis, ke ŝprucitaj homaj haŭtaj ĉeloj (fibroblastoj kaj keratinocitoj) havas la internan "scion" kiel vicigi sin post kiam ŝprucitaj sur vunditan haŭton (nia nuna studo montris tion). Alivorte, la ĉeloj de la malsupra tavolo de la haŭto - fibroblastoj, kaj tiuj de la supra tavolo - keratinocitoj, vicigas sin en tiu sinsekvo eĉ post esti kreskigitaj en la laboratorioplado kaj spertado de la ŝprucprocezo per mekanika aparato. Laŭ nia scio, ni estas la unua grupo kiu raportas, ke ŝprucitaj haŭtaj ĉeloj havas la potencialon restarigi la vunditan haŭton per generacio de la origina haŭta arkitekturo (epitelia tavoliĝo).

Due, ni ankaŭ lernis, ke malgrandaj modeloj prezentis diversajn defiojn por testi la ŝpruceblajn ĉelojn pro malgrandaj surfacaj areoj de la vundo kun "glitigaj" ĉeloj perdantaj kiam pansaĵoj estis aplikitaj. Ĉi tiuj decidaj lecionoj ekipis nin per la scio kaj la valorega sperto por povi desegni la sekvajn arojn de eksperimentoj, kiuj proksimigos nin al testado en homoj. Ekzemple, niaj longdaŭraj proksimaj partnerecoj kun kaj Renovacare (kiu posedas la ŝprucigaparaton) kaj ankaŭ kun niaj akademiaj kunlaborantoj en Parizo kaj Madrido, ebligos al ni, kiel la sekva etapo, testi la ŝprucigan genon kaj ĉelon. terapioj en pli grandaj modeloj kaj en homoj, respektive.

Ni antaŭĝojas antaŭenigi nian progreson al klinika traduko de ŝpruciga geno/ĉela terapio por EB. (El fina raporto januaro 2023.)