Ĉi tiu retejo uzas kuketojn por ke ni povu provizi al vi la plej bonan sperton de ebla uzanto. Kuket-informoj konserviĝas en via retumilo kaj plenumas funkciojn kiel rekoni vin, kiam vi revenos al nia retejo kaj helpas nian teamon kompreni, kiujn sekcioj de la retejo vi plej interesas kaj utilas.
Permanenta genterapio por DEB
Unua paŝo por anstataŭigi la rompitan kolagenan genon uzante novan formon de gena anstataŭiga terapio en konstanta traktado, kiu alportus dumvivan krizhelpon de DEB-haŭtaj simptomoj.
D-ro Joanna Jacków laboras ĉe King's College, Londono, UK pri ĉi tiu projekto por vidi ĉu la rompita geno respondeca por DEB-simptomoj povas esti korektita konstante uzante novan formon de genanstataŭiga terapio. Ĉi tiu nova aliro unue devas esti provita sur haŭtaj ĉeloj en la laboratorio por montri, ke eblas anstataŭigi la tuton de la rompita geno kaj ke tio povas esti farita kun konstanta efiko.
Legu pli en niaj blogoj de D-ro Jacków kaj D-ro Graham.
Pri nia financado
Esplorgvidanto | doktoro Joanna Jacków |
institucio | King's College, Londono, Britio |
Specoj de EB | DEB |
Partopreno de paciento | Neniu - haŭtaj ĉeloj kreskitaj en laboratorio |
Sumo de financado | 194,770 £ kunfinancite kun CureEB |
Longo de la projekto | 3 jaroj |
Komenca dato | 16 januaro 2024 |
DEBRA interna ID | GR000032 |
Projektaj detaloj
La unua paŝo de la procezo de enigado de funkcia geno estis atingita en "facile uzeblaj" ĉeloj en la laboratorio. Esploristoj nun laboras pri sekura kaj efika maniero fari tion en paciencaj haŭtaj ĉeloj. Esploristoj uzis nanopartiklojn por porti la funkciantan genon en ĉelojn en plado kaj nun testas ilin sur modela haŭto.
Rezultoj estis publikigitaj en 2024 en la Brita Revuo pri Dermatologio kaj en la Revuo por Esplora Dermatologio.
D-ro Jacków prezentis ĝisdatigon pri la projekto ĉe Membro-Semajnfino 2024:
Ĉefesploristo:
D-ro Joanna Jacków havas ampleksan sperton kaj pruvitan historion en epidermoliza buloza genterapio kaj genaj redaktaj aplikoj. Dr Jacków montris efikan genan redaktadon uzante diversajn genajn redaktajn ilojn, inkluzive de CRISPR-Cas9, bazan kaj ĉefan redaktadon, en DEB por precize ripari mutaciojn en keratinocitoj, fibroblastoj kaj indukteblaj plurpotentaj stamĉeloj (iPSCoj).
Kunesploristoj:
Profesoro John McGrath evoluigis progresintajn DEB-ĉelterapiojn bazitajn sur la injekto de COL7A1-korektitaj fibroblastoj, montrante sekurecon kaj fruan efikecon en klinikaj provoj. Li koncentriĝos pri ĉela specimena elekto kaj karakterizado kaj helpos krei dukton por rapida klinika tradukado de novaj COL7A1-genterapioj en pacientoj.
Profesoro Stephen Hart (UCL, GOSH, Londono) havas ampleksan sperton en novaj liverformuliĝoj kaj metodoj de terapiaj nukleaj acidoj kun ne-virusaj nanopartikloj kaj ilia apliko al la terapio de malsanoj inkluzive de mukoviskozo, neŭroblastomo, primara ciliara diskinezio, kaj denaska melanocita naevi. .
"Aŭskultante homojn kun DEB, ni scias, ke la revo pri "gena kremo" estas alta sur la dezirlisto de ĉiuj... Nia nova esplorprojekto temas pri evoluigado de konstanta formo de topika COL7A1-genterapio. En ĉi tiu etapo, ni volas evoluigi novan teknologion por konstante enigi kompletan kopion de la COL7A1-geno sekure en la genaron de iu kun DEB."
– D-ino Joanna Jacków
Subvenciotitolo: PASTE-Mediata Superexon Anstataŭaĵo de COL7A1 kiel Traktado por Distrofa Epidermolysis Bullosa
Dum la lastaj 30 jaroj ni lernis, ke DEB estas kaŭzita de DNA-variaĵoj en la tipo VII-kolagengeno (COL7A1). Sen funkcia geno COL7A1, la haŭto ne povas produkti sufiĉe da tipo VII-kolagenproteino, kio signifas, ke la haŭto estas malpli rezistema al vundo kaj veziketoj formiĝas. La defio por esploristoj estis kiel anstataŭigi aŭ ripari la COL7A1-genon. Aŭskultante homojn kun DEB, ni scias, ke la revo pri "gena kremo" estas alta en ĉies dezirlisto.
Ni ankaŭ estas ekscititaj de lastatempa progreso en evoluigado de nova topika COL7A1-gena produkto de kolegoj en Universitato Stanford en partnereco kun Krystal Biotech, kvankam tiu aliro devas havi ripetajn aplikojn por havi longdaŭran efikon. Nia nova esplorprojekto temas pri evoluigado de permanenta formo de topika COL7A1-genterapio. En ĉi tiu etapo, ni volas evoluigi novan teknologion por konstante enmeti kompletan kopion de la COL7A1-geno sekure en la genaron de iu kun DEB. La nova genterapia sistemo nomiĝas PASTO, kiu signifas "Programebla Aldono per Site-specifaj Celaj Elementoj". Por ĉi tiu projekto, ni uzos PASTE por enmeti la COL7A1-genon en DEB-haŭtajn ĉelojn. Ni tiam kontrolos ĉu ni povas restarigi la tipon VII-kolagenon. Tiam ni laboros pri optimumigo de lipidaj liversistemoj por certigi, ke ni povas ricevi la terapion en haŭton kaj ne nur ĉelojn. Nuntempe, ni ne faras klinikan provon, sed tio estos nia venonta plano.
Ĉi tiu projekto temigas evoluigado de intenco kuraci traktadon kontraŭ distrofa epidermolizo bullosa (DEB). Konsiderinda progreso estis farita evoluigante topikan genterapion por DEB uzanta ne-integrajn virusvektorojn por liveri COL7A1 al pafvundita haŭto kvankam ripeta administrado estas necesa por daŭranta utilo.
Kiel plia aliro, ni celas uzi konstantan integriĝon de plenlonga COL7A1-geno uzante programeblan aldonon per ejospecifaj celaj elementoj (PASTE). PASTO kombinas la specifecon kaj sekurecon de ĉefa redaktado kun la granda portanta kapacito de serinintegrazoj por enkonduki ĝis 36 kb da materialo ĉe specife realigitaj lokoj en la genaro. Konstanta integriĝo de plenlonga COL7A1-geno permesos "unu grandecon taŭgas por ĉiuj" DNA-redaktaliro.
Unue, ni elektos kaj karakterizos keratinocitojn kaj/aŭ fibroblastojn de DEB-pacienca haŭto. Ni tiam validigos PASTE-konstrudezajnon uzante elektroporadon de personecigitaj plasmidoj. COL7A1-genintegriĝo estos konfirmita per PCR- kaj Sanger-sekvencado. Sukcese redaktitaj ĉeloj estos izolitaj kaj rekarakterigitaj por ekzameni savon de tipo VII-kolageno. Post validumado de konstrudezajno, anstataŭe de plasmida DNA, PASTO-enzimoj estos liveritaj per en-vitro sintezita elektroporata mRNA. Poste, ni koncentriĝos pri liveraj metodoj, disvolvante receptor-celitajn lipid-bazitajn nanopartiklojn (LNPs) por liveri PASTE-maŝinaron al celĉeloj. Fagomontrado identigos peptidsekvencojn kiuj ligas forte kaj prefere al fibroblastoj kaj keratinocitoj. Lipidkomponentoj estos esploritaj por sia taŭgeco por topika apliko en 3D haŭtomodeloj. En resumo, ĉi tiu projekto planas evoluigi novan formon de genanstataŭiga terapio por DEB.
Nia projekto havas du ĉefajn celojn:
Unue, ni volas preni tutan kopion de ne-mutaciita geno kaj enigi ĝin en la DNA de pacientoj por ke iliaj ĉeloj povu komenci produkti la proteinon necesan por sana haŭto. Ĉi tio permesos al ni krei genotip-agnostikon (te ĝi funkcias negrave kiun mutacion havas paciento) kaj konstantan resanigon. En la pasintaj ses monatoj, ni akiris la unuan paŝon de la DNA-redaktado tre bone funkcianta en facile ŝanĝeblaj ĉeloj, sed paciencaj haŭtaj ĉeloj pruvas esti pli obstinaj. Ni nun laboras por certigi, ke ni havas sekuran kaj efikan protokolon por ŝanĝi DNA en la gravaj ĉeloj.
Due, ni volas krei nanopartiklojn, kiuj povas porti ĉi tiun DNA-redaktan maŝinaron en haŭtajn ĉelojn kun facile apliki topika kremformularo. Ni eksperimentas kun malsamaj formuloj por ĉi tiuj nanopartikloj. Ni atingis kelkajn esperigajn rezultojn aplikante nanopartiklojn al ĉeloj en plado, kaj nun ni elprovas ilin sur modela haŭto. Ĉi tio estos pli malfacila (haŭto evoluis specife por konservi aferojn ekstere), sed ĉe EB-pacientoj, la haŭta baro jam estas malfortigita kaj interrompita. Ni esploras manierojn antaŭtrakti la modelan haŭton por reprodukti la haŭton de pacientoj kun EB, kaj espereble tio lasos la nanopartiklojn penetri pli profunde en la histon.
Nuntempe ni interparolas kun la Ekonomiisto por ke ĵurnalisto venu kaj observu nian laboron, por ke ŝi povu verki artikolon pri nia progreso.